Aktywacja makrofagów pochodzących ze szpiku kostnego myszy w odpowiedzi na przeciwciała

Po ekspozycji na patogen makrofagi ulegają aktywacji i uwalniają cytokiny prozapalne i przeciwzapalne, koordynując odpowiedź układu odpornościowego.

Aby zbadać aktywację makrofagów pochodzących ze szpiku kostnego in vitro, należy przenieść izolowaną zawiesinę komórek szpiku kostnego myszy do kolby hodowlanej. Krótko inkubować.

Komórki mezenchymalne, monocyty i dojrzałe makrofagi przylegają do powierzchni kolby, podczas gdy hematopoetyczne komórki progenitorowe pozostają w zawiesinie.

Zebrać pożywkę zawierającą krwiotwórcze czynniki progenitorowe i odwirować. Przenieść komórki zawieszone w pożywce mleczka stymulującego tworzenie kolonii makrofagów, M-CSF, do kolby hodowlanej.

M-CSF powoduje, że subpopulacja przodków szpiku różnicuje się w makrofagi, które wydają się rozgałęzione i przylegają do kolby.

Wyrzuć nieprzylegające pożywki zawierające komórki. Dodaj pożywkę M-CSF i inkubuj. Gdy makrofagi osiągną w pełni funkcjonalny stan, zbierz je. Wirówka.

Makrofagi płytkowe zawieszone w pożywkach M-CSF do wielodołkowych dołków płytkowych. Po przyleganiu makrofagów do studzienek dodaj ludzkie immunoglobuliny poliklonalne i bakteryjny lipopolisacharyd, LPS, toksynę.

Immunoglobuliny wiążą s