Wpływ przeciwciała anty C-fms na osteoklastogenezę w komórkach szpiku kostnego myszy in vitro

Osteoklastogeneza to proces, w którym prekursory osteoklastów różnicują się i łączą się, tworząc wielojądrowe osteoklasty.

Aby zbadać wpływ przeciwciała anty-c-fms na osteoklastogenezę in vitro, należy pobrać płytkę hodowlaną zawierającą zawiesinę komórek szpiku kostnego myszy. Dodaj czynnik stymulujący tworzenie kolonii makrofagów, M-CSF.

W hodowli M-CSF wiąże się ze swoim specyficznym receptorem, c-fms, na komórkach prekursorowych szpiku, aktywując szlaki sygnałowe i powodując różnicowanie do makrofagów szpiku kostnego, BMM, które reprezentują prekursory osteoklastów i przylegają do płytki.

Usuń nieprzylegające komórki. Zbierz BMM i wysiew je w wielodołkowych dołkach płytkowych. Suplement z M-CSF i aktywatorem receptora liganda czynnika jądrowego kappa-Β, RANKL.

Dodaj rosnące stężenia przeciwciał anty-c-fms do studzienek.

W studzience kontrolnej M-CSF wiąże się z receptorami c-fms i aktywuje szlaki sygnałowe, stymulując ekspresję receptora RANK i promując przeżycie i proliferację BMM. RANKL wiąże się z receptorami RANK, wyzwalając kaskadę sygnalizacyjną i powodując różnicowanie BMM i fuzję z osteoklastami.

W studzienkach o wyższych stężeniach przeciwciał wiążą się i skutecznie bl