JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:50 min. • July 8th, 2025
Siarczan dekstranu sodu lub DSS wywołuje zapalenie jelita grubego - chorobę zapalną jelit - w której przerwanie bariery nabłonkowej jelit prowadzi do stanu zapalnego.
Aby ocenić uszkodzenie tkanki, należy pobrać utrwaloną tkankę okrężnicy wyizolowaną z mysiego modelu zapalenia jelita grubego wywołanego przez DSS. Zanurz tkankę w podłożu do zatapiania, aby ułatwić cięcie, i szybko zamroź.
Za pomocą kriomikrotomu uzyskaj cienki wycinek tkanki i zbierz go na szkiełku podstawowym.
Zanurz szkiełko w roztworze zawierającym utleniony barwnik hematoksyny związany z zaprawą - kationem metalu - nadając barwnikowi ładunek dodatni. Kompleks barwnikowo-zaprawowy wiąże się z ujemnie naładowanym DNA, barwiąc jądro na czerwono-fioletowo.
Zanurz tkankę w różnicującym roztworze kwasowo-alkoholowym, usuwając niespecyficznie związany barwnik z cytoplazmy i macierzy zewnątrzkomórkowej. Opłucz tkankę w środku niebieszczącym - środowisku alkalicznym - nadając jądrom niebieski kolor, zwiększając kontrast.
Zanurz szkiełko w rosnącym stężeniu alkoholu, aby odwodnić tkankę, zwiększając penetrację przeciwplam.
Zanurz tkankę w przeciwbarwniku - kwaśnym roztworze eozyny - nadając różowy kolor podstawowym białko
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych