Zabijanie komórek K562 przez jednojądrzaste komórki krwi obwodowej wystawione na działanie preparatów wyrobów tytoniowych

Komórki nowotworowe aktywują efektorowe komórki odpornościowe do uwalniania cytokin i granulek cytolitycznych zawierających perforynę i granzymy. Perforyna tworzy pory w błonie komórkowej guza, ułatwiając wnikanie granzymu do komórki i inicjując apoptozę, powodując śmierć komórki.

Aby przeanalizować funkcję cytolityczną ludzkich komórek jednojądrzastych krwi obwodowej, PBMC, po przygotowaniu wyrobu tytoniowego, TPP, ekspozycji, należy pobrać płytkę wielodołkową o rosnących stężeniach TPP. Studzienka zawierająca podłoże pełni rolę kontrolną.

Dodaj zawieszenie PBMC. Główny środek immunosupresyjny TPP, nikotyna, wiąże się z efektorowymi receptorami acetylocholiny genuetynowej PBMC, zmniejszając produkcję cytokin prozapalnych.

wirówka. Usunąć supernatant zawierający TPP. Ponowne zawieszenie PBMC w nośniku. Dodaj do studzienek znakowane fluorescencyjnie komórki K562, ludzkie komórki białaczkowe o zwiększonej podatności na cytotoksyczność komórek efektorowych PBMC.

Komórki efektorowe traktowane TPP ze stłumioną odpowiedzią immunologiczną wykazują zmniejszoną ekspresję perforyny i uwalnianie cytokin, zmniejszając zdolność cytolityczną PBMC.

wirówka. Ponownie zawiesić komórki w buforze, a