JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:12 min. • July 8th, 2025
Aby zbadać wpływ środków przeciwdrobnoustrojowych na agregaty bakteryjne, należy wziąć kulturę Pseudomonas aeruginosa w pożywce wzrostowej, która sprzyja tworzeniu się agregatów — symulując wzrost podczas infekcji.
Zmodyfikowane bakterie wykazują ekspresję białka fluorescencyjnego do wykrywania agregatów pod mikroskopem fluorescencyjnym. Obraz w trzech wymiarach, aby obliczyć objętość agregatów lub biomasy bakteryjnej i zwizualizować wzrost biomasy w czasie, wskazując na wzrost bakterii.
Dodaj kolistynę - kationowy peptyd przeciwdrobnoustrojowy - w subletalnym stężeniu, które zabija wrażliwe bakterie, wybierając te tolerancyjne na antybiotyki.
Kolistyna wiąże się z ujemnie naładowanymi lipopolisacharydami lub LPS na zewnętrznej błonie bakteryjnej, przemieszczając mostki kationowe, które stabilizują monowarstwę LPS - uszkadzając integralność błony.
Kolistyna dostaje się do peryplazmy i wiąże się z LPS na błonie komórkowej, rozrywając błonę i powodując lizę komórek. Jako mechanizm przeciwdziałający, określone mutacje genetyczne w podzbiorze bakterii neutralizują ujemny ładunek LPS. Modyfikacja ta hamuje oddziaływanie elektrostatyczne kationowej kolistyny z mniej anionowym LPS - zapob
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych