JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:33 min. • July 8th, 2025
Aby rozpocząć test jednostki tworzącej kolonię lub CFU w celu ilościowego określenia żywych bakterii, należy pobrać wielodołkową płytkę zawierającą hodowane makrofagi w pożywce wzrostowej. Zakażenie makrofagów Listeria monocytogenes, bakterią chorobotwórczyą zdolną do wzrostu wewnątrzkomórkowego.
Podczas infekcji makrofagi pochłaniają bakterie, internalizując je w przedziale związanym z błoną - fagosomie.
Bakterie wydzielają toksynę tworzącą pory i rozrywają błonę fagosomalną. W ten sposób bakterie mogą dostać się do cytozolu i replikować się w makrofagach.
Krótko potraktuj zakażone makrofagi gentamycyną, antybiotykiem, który selektywnie eliminuje niezinternalizowane bakterie, zachowując jednocześnie bakterie wewnątrzkomórkowe.
Odessać leżące nad nim podłoże zawierające antybiotyki. Następnie dodaj sterylną wodę destylowaną na zakażone makrofagi, tworząc hipotoniczne środowisko. Prowadzi to do osmozy, w której cząsteczki wody dostają się do komórek i powodują lizę makrofagów, uwalniając składniki wewnątrzkomórkowe, w tym bakterie.
Rozprowadź lizat komórkowy zawierający bakterie wewnątrzkomórkowe na płytce agaru lizogennego, sprzyjając separacji poszczególnych komórek bakteryjnych i
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych