Technika septycznego nakłuwania szpilek w celu wprowadzenia ogólnoustrojowej infekcji bakteryjnej u much

Aby zbadać odpowiedź immunologiczną Drosophila na drobnoustroje chorobotwórcze, weź zawiesinę żywotnych patogenów bakteryjnych. Zanurzyć jałową igłę w zawiesinie, zbierając niewielką ilość.

Umieść znieczuloną muchę pod mikroskopem preparacyjnym. Za pomocą zainfekowanej igły nakłuj muchę w płytkę mostkowo-opłucnową klatki piersiowej. Nakłucie wprowadza bakterie do hemolimfy – płynu krążącego w jamie ciała.

Umieść zakażone muchy w fiolce zawierającej pokarm dla much i utrzymuj je przez odpowiedni okres.

Bakterie wykorzystują hemolimfę jako bogate źródło składników odżywczych i namnażają się, co powoduje infekcję ogólnoustrojową. Hemolimfa zawiera hemocyty, krążące komórki efektorowe układu odpornościowego.

Hemolimfa jest również związana z ciałem tłuszczowym, wyspecjalizowaną tkanką do magazynowania energii. Receptory rozpoznawania wzorców na komórkach ciała tłuszczowego wchodzą w interakcję z bakteriami. Ta interakcja indukuje komórki do wydzielania peptydów przeciwdrobnoustrojowych, pośredniczących w zabijaniu bakterii.

Krążące hemocyty oddziałują z bakteriami za pośrednictwem receptorów fagocytarnych, powodując ich pochłanianie przez fagosomy i powodując degradację bakterii.

Podzb