JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:20 min. • July 8th, 2025
Aby stworzyć wycinającą ranę skóry, zacznij od umieszczenia znieczulonej myszy w pozycji leżącej i ogolenia jej grzbietu, aby odsłonić naskórek, najbardziej zewnętrzną warstwę skóry.
Zastosuj roztwór dezynfekujący, aby zmniejszyć ryzyko zanieczyszczenia. Weź narzędzie do biopsji dziurkacza — puste metalowe narzędzie z okrągłym ostrzem na krawędzi, aby uzyskać precyzyjne cięcie.
Umieść narzędzie do biopsji dziurkacza prostopadle na środku wstępnie przygotowanego obszaru operacyjnego. Uciskaj naskórek w dół, aby utworzyć okrągłe nacięcie.
Przekręć narzędzie do biopsji dziurkowej, penetrując naskórek i skórę właściwą - środkową warstwę skóry. Powoduje to pełne okrągłe cięcie na naskórku i skórze właściwej bez uszkadzania leżącej pod spodem powięzi, która jest włóknistą warstwą tkanki łącznej otaczającą mięsień.
Wypreparuj warstwy skóry zgodnie z okrągłym wzorem i usuń je, tworząc wycinającą ranę skóry z odsłoniętą warstwą podskórną, gotową do badań immunologicznych.
W przypadku wycinania ran skóry u zwierząt biorców, potwierdź brak reakcji na szczypanie palców u nóg przed goleniem odcinka o wymiarach 1 na 2 cale z tyłu myszy. Delikatnie przetrzyj, aby usunąć wszelkie zabłąkane włoski i zdezynfekuj odsłoniętą skórę za pomocą sekwencyjnych aplikacji gazy nasączonej 10% jodonem powidonem i 70% etanolem, przesuwając się na zewnątrz od środka pola operacyjnego spiralnie.
Po pozostawieniu skóry do wyschnięcia na około minutę, mocno dociśnij sterylną 6-milimetrową biopsję dziurkowaną na środku przygotowanego obszaru operacyjnego. Przekręć biopsję stempla, aby utworzyć okrągły kontur na skórze, który całkowicie przecina tkankę skórną w co najmniej jednej części konturu, uważając, aby nie przeciąć leżącej poniżej powięzi lub tkanki. Następnie użyj sterylnych nożyczek i kleszczyków, aby przeciąć naskórek i skórę właściwą, podążając za okrągłym wzorem odciśniętym przez biopsję stempla.