JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:15 min. • July 8th, 2025
Zacznij od wysiewu komórek gospodarza ssaków w dolnej komorze przepuszczalnego systemu błonowego.
Dodaj Streptococcus — bakterię chorobotwórczości, o której wiadomo, że wydziela toksynę streptolizyny S lub SLS, do wkładki membranowej. Toksyna SLS dyfunduje przez pory błony i dociera do komórki gospodarza.
Związane z błoną kotransportery wodorowęglanu sodu regulują transport jonów, utrzymując homeostazę komórkową. Toksyna wiąże się z tymi kotransporterami, zaburzając transport jonów i powodując stres osmotyczny w komórkach gospodarza.
To aktywuje kilka kaskad sygnałowych w dalszej kolejności, w tym p38 MAPK, szlak kinazy białkowej aktywowany mitogenem. Aktywowany p38 MAPK fosforyluje swoje dalsze cele, inicjując odpowiedź komórkową przeciwko bakteriom.
Następnie wyjmij przepuszczalny wkład membranowy. Odessać pożywkę powyżej komórek gospodarza. Dodaj bufor do lizy, aby uwolnić zawartość komórkową. Wirówka do granulowania resztek komórek.
Zebrać sklarowany osad zawierający rozpuszczalne składniki lizatu i osad zawierający nierozpuszczalne składniki lizatu. Przechowywać próbki do dalszej analizy.
Bezpośrednio przed zabiegiem należy użyć 1X PBS do przemycia komórek. Następnie nałóż 2 m
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych