JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:05 min. • July 8th, 2025
Pobrać płytkę wielodołkową zawierającą przylegającą monowarstwę komórek nabłonka podatną na przyleganie bakterii.
Dodaj różną liczbę znakowanych białkiem fluorescencyjnym Pseudomonas aeruginosa, bakterii chorobotwórczej, aby uzyskać pożądany stosunek bakterii do komórek nabłonka.
Wirówka, aby zbliżyć bakterie do komórek nabłonka, ułatwiając interakcje.
Pilusy typu IV, włókna białkowe bakterii, odgrywają kluczową rolę, wiążąc się ze specyficznymi glikolipidami na komórkach nabłonka, pośrednicząc w przyleganiu bakterii do komórek gospodarza.
Po inkubacji przemyć buforem w celu usunięcia nieprzylegających bakterii. Napraw komórki, aby zachować strukturę komórki.
Dodaj DAPI, barwnik fluorescencyjny, który silnie wiąże się z regionami DNA bogatymi w A-T, barwiąc jądro. Przykryj komórki buforem, aby zapobiec wysuszeniu komórek.
Uzyskaj obrazy bakterii znakowanych GFP przyczepionych do komórek nabłonka z jądrem barwionym DAPI. Wylicz przylegające bakterie na pojedynczej komórce nabłonka.
Zwiększona liczba bakterii przylegających na komórkę gospodarza w sposób zależny od dawki umożliwia ilościowe określenie interakcji gospodarz-patogen.
W celu przeprowadzenia testu przylegania bakterii nal
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych