JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:00 min. • July 8th, 2025
Pobrać wielodołkową płytkę z mezenchymalnymi komórkami macierzystymi (MSC) w wybranych studzienkach.
Wprowadź makrofagi i inkubuj, ułatwiając interakcję MSC-makrofagi w studzienkach kokulturowych.
Dodaj zymosan - składnik ściany komórkowej drożdży - sprzężony z wrażliwym na pH fluoroforem do wszystkich studzienek.
Receptory wymiatające makrofagi wiążą się z zymosanem, wywołując jego pochłonięcie wewnątrz fagosomu, który łączy się z lizosomem, tworząc fagolizosom.
Kwaśne pH wewnątrz fagolizosomu powoduje, że fluorofor emituje fluorescencję.
W studzienkach do wspólnej hodowli MSC emitują nanorurki tunelowe lub TNT, cytoplazmatyczne przedłużenia, które łączą się z makrofagami. Mitochondria MSC przemieszczają się przez TNT, aby dostać się do makrofagów, zwiększając całkowitą liczbę funkcjonalnych mitochondriów.
Podwyższona liczba mitochondriów zwiększa produkcję adenozynotrójfosforanu lub ATP, który napędza zapotrzebowanie na energię do wzrostu fagocytozy.
Zapisz intensywność fluorescencji w czasie z uwewnętrznionych zymozanów sprzężonych z fluoroforem.
Wspólna hodowla wykazuje zwiększoną fluorescencję w porównaniu ze studzienkami zawierającymi tylko makrofagi, co wskazuje na wzmocnien
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych