Model zakażenia błony śluzowej szyjki macicy u człowieka do badania patogenezy HIV w warunkach ex vivo

Umieść błonę śluzową macicy szyjki macicy na szalce Petriego. Oddziel błonę śluzową szyjki macicy i szyjki macicy od błony podśluzowej. Pokrój warstwę błony śluzowej na mniejsze eksplantaty i przenieś je do stożkowej probówki.

Dodaj ludzki wirus niedoboru odporności typu 1 lub HIV-1 do probówki z eksplantatem. Cząsteczki wirusa HIV-1 zbliżają się do odsłoniętej warstwy błony śluzowej i wiążą się z receptorem CD4 i koreceptorem CXCR4 na komórce gospodarza.

Po związaniu otoczka wirusa łączy się z błoną komórkową gospodarza, uwalniając kapsyd wirusa zawierający wirusowe RNA i enzym odwrotnej transkryptazy do cytoplazmy. Wewnątrz cytoplazmy odwrotna transkryptaza przekształca wirusowe RNA w komplementarne DNA lub cDNA.

cDNA przemieszcza się do jądra komórki gospodarza, gdzie integraza włącza DNA wirusa do genomu gospodarza. DNA wirusa kieruje syntezą nowego wirusowego RNA i białek, które łączą się w nowe cząsteczki wirusa. Cząsteczki te odrywają się od komórki gospodarza, uzyskując otoczkę lipidową.

Przepłukać eksplantaty odpowiednim buforem, aby usunąć wszelkie niezwiązane wirusy. Na koniec umieścić eksplantaty na gąbce żelatynowej na płytce wielodołkowej z odpowiednim podłożem i inku