Mikroskopia przyżyciowa do analizy interakcji komórka-śródbłonek krwi w mysim modelu zapalenia

Zacznij od znieczulonej myszy, której wstrzyknięto dootrzewnowo lipopolisacharyd w celu wywołania stanu zapalnego.

Naciąć brzuch, aby odsłonić jamę brzuszną. Utrzymuj nawodnienie narządów za pomocą soli fizjologicznej. Wstrzyknąć rodaminę 6G po orbicie. Cząsteczki barwnika fluorescencyjnego dostają się do krążenia i znakują leukocyty i płytki krwi w celu ich wizualizacji.

Teraz uzewnętrznij pętlę jelita krętego z naczyniami krezkowymi. Utrzymuj nawodnienie tkanki za pomocą wstępnie podgrzanej soli fizjologicznej, aby uzyskać optymalne obrazowanie. Pod mikroskopem fluorescencyjnym skoncentruj się na żyle krezki do mikroskopii przyżyciowej.

Iniekcja lipopolisacharydu powoduje aktywację komórek śródbłonka z regulacją w górę cząsteczek adhezyjnych, w tym selektyn. Krążące płytki krwi są rekrutowane do śródbłonka, gdzie wiążą się poprzez specyficzne interakcje cząsteczka-ligand adhezyjny, tworząc kompleksy adhezyjne

.

Dzięki tym interakcjom płytki krwi uaktywniają się i uwalniają granulki zawierające cząsteczki, w tym serotoninę, sprzyjające rekrutacji leukocytów.

Leukocyty przemieszczają się na powierzchnię śródbłonka i wiążą się z aktywowanymi płytkami krwi. Ponadto leukocyty toczą się