JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:37 min. • July 8th, 2025
Podczas infekcji makrofagi pęcherzykowe uwalniają zewnątrzkomórkowe pułapki makrofagów lub MET w celu wyeliminowania patogenów.
MET składają się z włókien chromatyny skompleksowanych z deiminazami peptydyloargininy, PAD, metaloproteinazami macierzy i cytrulinowanymi histonami.
Aby uwidocznić MET w makrofagach z płynu z płukania oskrzelowo-pęcherzykowego, najpierw odwiruj płyn.
Zawiesiny zawiesin należy umieścić na szkiełkach nakrywkowych w studzienkach płytkowych z wieloma dołkami.
Makrofagi przyczepiają się do szkiełek nakrywkowych, podczas gdy inne komórki pozostają zawieszone i są odrzucane.
Napraw makrofagi, zachowując strukturę komórkową. Przepuszczalność ich, aby uzyskać dostęp do celów komórkowych.
Dodaj białka blokujące, zapobiegając niespecyficznemu wiązaniu przeciwciał.
Suplement z pierwszorzędowym koktajlem przeciwciał, który wiąże się odpowiednio z docelowymi cytrulinowanymi histonami, PAD i metaloproteinazami macierzy.
Dodaj różne przeciwciała drugorzędowe znakowane fluoroforem, które wiążą się z docelowymi przeciwciałami pierwszorzędowymi związanymi z białkiem MET.
Zamontuj ogniwa za pomocą podłoża montażowego zawierającego DAPI. DAPI, barwnik fluorescencyjny, barwi w
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych