Stymulacja in vitro i wizualizacja pułapek zewnątrzkomórkowych makrofagów
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:31 min. • July 8th, 2025
Zacznij od przylegającej kultury makrofagów.
Dodaj cytokiny prozapalne.
Cytokina wiąże się z receptorami powierzchniowymi makrofagów, inicjując serię zdarzeń zapalnych.
Po pierwsze, sygnalizacja cytokin wyzwala produkcję peptydów przeciwdrobnoustrojowych.
Jednocześnie chromatyna w jądrze makrofaga ulega dekondensacji.
Proces ten, w połączeniu ze zmianami w składzie błony, rozrywa błonę jądrową, uwalniając zdekondensowaną chromatynę do cytoplazmy.
W cytoplazmie peptyd przeciwdrobnoustrojowy oddziałuje z uwolnioną chromatyną.
Permeabilizacja błony komórkowej za pośrednictwem sygnalizacji cytokin powoduje uwolnienie zdekondensowanej chromatyny do przestrzeni zewnątrzkomórkowej, tworząc zewnątrzkomórkową pułapkę makrofagów lub MET.
Te przypominające sieć struktury składają się z DNA, histonów, cząsteczek przeciwdrobnoustrojowych i enzymów.
Dodaj SYTOX green, fluorescencyjny barwnik kwasu nukleinowego, który selektywnie wiąże się z odsłoniętym DNA w pułapkach zewnątrzkomórkowych.
Pod mikroskopem fluorescencyjnym MET pojawia się jako zielone smugi zewnątrzkomórkowego DNA uwolnione ze stymulowanego makrofaga.
W sterylnych warunkach przygotować pożywki hodowlane zawierające różne stymulato
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych