JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:35 min. • July 8th, 2025
Weź zjadliwe i mniej zjadliwe szczepy Staphylococcus aureus.
Dodaj surowicę, aby opsonizować bakterie.
Przenieść rosnące stężenie bakterii do schłodzonych wielodołkowych studzienek płytkowych zawierających neutrofile. Niskie temperatury uniemożliwiają aktywację neutrofili
.Wirówka ułatwiająca zsynchronizowaną fagocytozę.
Receptory neutrofilowe wiążą opsoniny, wywołując internalizację bakterii w fagosomach.
W przypadku zjadliwych bakterii środowisko fagosomalne wyzwala ekspresję toksyn cytolitycznych.
Toksyny te tworzą pory, zaburzając działanie fagosomów i naruszając integralność błony neutrofili
.Jednak mniej zjadliwe bakterie wykazują zmniejszoną ekspresję toksyny cytolitycznej.
Po inkubacji odłączyć neutrofile i przenieść je do probówek cytometru przepływowego zawierających barwnik fluorescencyjny jodku propydyny (PI).
Barwnik dostaje się do neutrofili z uszkodzonymi błonami i barwi DNA.
Za pomocą cytometru przepływowego przeanalizuj neutrofile pod kątem barwienia PI.
Zależny od stężenia wzrost odsetka granulocytów obojętno-dodatnich po fagocytozie zjadliwego szczepu, w porównaniu z mniej zjadliwym szczepem, wskazuje na cytotoksyczność zjadliwego szczepu wobec neutrofili.
Gdy su
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych