JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:26 min. • July 8th, 2025
Wystaw mysz na działanie kropelek aerozolu zawierających Mycobacterium tuberculosis.
Bakterie docierają do światła pęcherzyków płucnych – maleńkich woreczków powietrznych w płucach – zawierających makrofagi.
Receptory rozpoznawania wzorców makrofagów wiążą się z wzorcami molekularnymi bakterii związanymi z patogenami, powodując ich pochłonięcie przez fagosom.
Pochłonięte bakterie wydzielają wyspecjalizowane białka, które rozrywają błonę fagosomu. Bakterie uciekają do cytoplazmy i rozmnażają się.
Po zakażeniu znieczulić mysz. Dootrzewnowo podać substrat reporterowy bakteryjnego enzymu β-laktamazy do fluorescencji enzymu reporterowego lub obrazowania REF.
Substrat dociera do pęcherzyków płucnych poprzez krążenie i wnika do zakażonych komórek.
Przenika przez zewnętrzną błonę bakteryjną, aby dotrzeć do przestrzeni peryplazmatycznej zawierającej β-laktamazę.
Podłoże zawiera pierścień β-laktamowy łączący fluorochrom i wygaszacz. Ze względu na bliskość, fluorescencja fluorochromu jest absorbowana przez wygaszacz.
β-laktamaza hydrolizuje pierścień β-laktamowy, uwalniając fluorofor i powodując emisję fluorescencji.
Zobrazuj fluorescencję, aby ocenić infekcję prątkami.
Aby kontynuować, załad
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych