JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:46 min. • July 8th, 2025
Rozpocząć od płytki wielodołkowej zawierającej makrofagi pochodzące ze szpiku kostnego na szkiełkach nakrywkowych.
Traktuj makrofagi promastigotykami Leishmania - stadium zakaźne pasożyta.
Podczas inkubacji pasożyty wchodzą w interakcje z makrofagami, ułatwiając gromadzenie się F-aktyny wokół miejsca interakcji.
Makrofagi pochłaniają pasożyty w fagosomach otoczonych F-aktyną, tworząc parazytoforyczne wakuole lub PV - niszę replikacyjną.
W PV pasożyty uwalniają czynniki przeżycia, zwiększając akumulację F-aktyny wokół wakuoli i hamując ich fuzję z lizosomami.
Dodatkowo pasożyty zwiększają produkcję hepcydyny – hormonu peptydowego makrofagów, hamując uwalnianie żelaza i podnosząc wewnątrzkomórkowy poziom żelaza.
Napływ żelaza do wakuoli sprzyja różnicowaniu promastigotów w patogenne amastigoty i ułatwia ich namnażanie, zwiększając zjadliwość.
Po inkubacji umyj w celu usunięcia wolnych pasożytów, a następnie napraw i przepuszczalność zainfekowanych makrofagów.
Wprowadź barwnik fluorescencyjny kwasu nukleinowego, aby zabarwić jądra zakażonych makrofagów i amastigotów.
Pod mikroskopem fluorescencyjnym małe jądra skupione wokół dużego jądra makrofaga potwierdzają obecność pasożytów wewną
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych