JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:02 min. • July 8th, 2025
Zacznij od naczynia zawierającego osadzone w agarozie, znieczulone, transgeniczne larwy danio pręgowanego, wyrażające fotokonwertowalne białko fluorescencyjne w swoich leukocytach - fagocytarnych komórkach odpornościowych.
Lewy pęcherzyk uszny, wstępnie wstrzyknięty bakteriami znakowanymi czerwonym barwnikiem fluorescencyjnym, jest umieszczony płasko na dnie naczynia.
W obrębie pęcherzyka usznego wstępnie wstrzyknięte bakterie powodują miejscową infekcję, wywołując migrację komórek odpornościowych i uwalnianie chemokin, powodując infiltrację leukocytów do pęcherzyka usznego.
Pod mikroskopem fluorescencyjnym obserwuj początkową rekrutację zielonych leukocytów i fagocytozę czerwonych bakterii przez leukocyty w miejscu infekcji.
Oświetl pęcherzyk uszny falą o długości fali 405 nanometrów, nieodwracalnie przekształcając fotokonwertowalne białko fluorescencyjne z zielonego na czerwone i nadając czerwoną fluorescencję leukocytom - umożliwiając ich wyraźną wizualizację i precyzyjne śledzenie.
Teraz zbadaj larwy na dwóch różnych długościach fal na różnych głębokościach, umożliwiając wizualizację zarówno fotokonwertowanych czerwonych, jak i pozostałych leukocytów zielonej fluorescencji.
Fot
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych