JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:49 min. • July 8th, 2025
Weźmy filtr odśrodkowy o dużej objętości zawierający pionowe membrany z regenerowanej celulozy o odpowiedniej wielkości porów.
Dodaj bufor i wirówkę. Usunąć przepływowy środek utrzymujący wilgoć membranowy.
Załaduj urządzenie białkiem filtratu z kultur bakteryjnych lub CFP, obejmującym rozpuszczalne białka i pęcherzyki zewnątrzkomórkowe lub EV – nanowymiarowe struktury związane z lipidami zawierające biomolekuły wydzielane przez bakterie.
Podczas wirowania CFP przechodzi stycznie przez membrany za pomocą siły odśrodkowej.
Biomolekuły mniejsze niż pory błony przechodzą przez płyn hodowlany, podczas gdy większe, takie jak EV, przechodzą przez powierzchnię membrany, minimalizując zatykanie błony.
Filtr koncentruje CFP w minimalnej objętości urządzenia, wspomagany przez jego martwą objętość, aby zapobiec wysychaniu biomolekuł.
Dodaj bufor i wirówkę.
Bufor zastępuje resztkowe składniki pożywki, tworząc środowisko izotoniczne dla biomolekuł CFP i zachowując ich integralność.
Umieść kubek na koncentrat nad kubkiem filtra, odwróć i odwiruj. Odzyskać skoncentrowany retentat CFP do dalszej analizy.
Na początek przygotuj filtr odśrodkowy o masie cząsteczkowej 100 kilodaltonów, dodając pełną o
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych