JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:38 min. • July 8th, 2025
Weź kolumnę chromatograficzną wykluczającą wielkość wypełnioną obojętną matrycą cząstek żywicy polisacharydowej. Porowate cząstki mają określoną wielkość porów.
Przepłukać kolumnę buforem równoważącym w celu optymalnego oczyszczenia.
Dodać skoncentrowany filtrat hodowlany przetworzony z kultury Mycobacterium tuberculosis — bakterii chorobotwórczej. Przesącz zawiera pęcherzyki zewnątrzkomórkowe lub EV i inne rozpuszczalne białka wydzielane przez bakterie.
Pojazdy elektryczne to niejednorodne, małe, kuliste konstrukcje. Zawierają makrocząsteczki i czynniki wirulencji zamknięte w dwuwarstwie lipidowej.
Próbka dostaje się do matrycy pod wpływem grawitacji. Dodaj bufor, aby umożliwić przepływ próbki przez kolumnę.
Pojazdy elektryczne nie mogą dostać się do żywicy ze względu na mały rozmiar porów, a zamiast tego poruszają się w przestrzeni międzycząsteczkowej, pokonując krótszą drogę i najpierw eluując.
Białka, mające mniejszy rozmiar, wnikają w pory, pokonują dłuższą drogę przez żywicę i eluują na końcu.
Zebrać frakcje zawierające EV do dalszej analizy.
Pozwolić, aby chromatografia wykluczająca wielkość lub kolumna SEC zrównoważyła się do temperatury pokojowej. Włącz AFC za pomocą wyłąc
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych