JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 6:34 min. • July 8th, 2025
Weź zawiesinę chemicznie zabitego, znakowanego fluorescencyjnie Bacillus anthracis.
Kapsułka bakteryjna, składająca się głównie z kwasu poligamma-glutaminowego, zapewnia ochronę przed fagocytozą.
Weźmy surowice naczelnych innych niż ludzie, inaktywowane termicznie w celu zniszczenia białek dopełniacza. Surowice te, wyizolowane od zwierząt uodpornionych szczepionką na bazie kapsułek bakteryjnych, zawierają przeciwciała antykapsułkowe.
Dodać chemicznie zabitą zawiesinę bakteryjną do surowicy. Przeciwciała specyficznie wiążą się z kapsułkami bakteryjnymi, ułatwiając opsonizację bakterii i oznaczając je do eliminacji przez komórki fagocytarne. Dodaj standardowe białka dopełniacza, aby zwiększyć opsonizację.
Przenieś opsonizowane bakterie do przylegających makrofagów - komórek fagocytarnych. Krótko inkubować.
Przeciwciała i białka dopełniacza na bakteriach wiążą się odpowiednio z receptorami Fc makrofagów i receptorami dopełniacza, sprzyjając przyleganiu bakterii.
Usuń nośnik. Umyć buforem, aby usunąć nieprzylegające bakterie.
Napraw komórki, aby zachować integralność komórkową.
Użyj barwnika fluorescencyjnego, aby oznaczyć makrofagi.
Za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego obserwuj bakt
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych