JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 6:56 min. • July 8th, 2025
Weźmy erytrocyty zakażone Plasmodium falciparum. Oznacz DNA pasożyta barwnikiem fluorescencyjnym w celu wizualizacji pasożyta.
Inkubuj te zakażone pasożytami erytrocyty z surowicami od osób narażonych na malarię. Komórki te wykazują na swojej powierzchni antygeny pasożytów, które przyłączają się do naturalnie nabytych ludzkich przeciwciał IgG w surowicach, opsonizując komórki do fagocytozy.
Przenieś opsonizowane erytrocyty zakażone pasożytem na pokrytą białkiem płytkę wielodołkową zawierającą zawiesinę monocytów pochodzenia ludzkiego - lub komórek fagocytarnych.
Podczas inkubacji receptory Fc-gamma na monocytach oddziałują z erytrocytami opsonizowanymi IgG, wywołując pochłanianie erytrocytów w fagosomach.
Po inkubacji odwirować płytkę, aby zapobiec dalszym interakcjom komórkowym i zatrzymać fagocytozę.
Odrzucić supernatant. Leczyć roztworem lizy chlorku amonu, selektywnie rozrywając niefagocytozowane zakażone erytrocyty bez wpływu na monocyty.
Dodaj bufor zawierający surowicę, aby zatrzymać proces lizy. Odwirować i odrzucić supernatant zawierający lizowane erytrocyty.
Ponownie zawiesić monocyty w buforze.
Wykonaj cytometrię przepływową, aby określić ilościowo monocyty, które wykazu
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych