JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:46 min. • July 8th, 2025
Dodaj próbki ludzkich łez i koktajl przeciwciał i kulek do umytej płytki testowej.
Przeciwciała są związane z oznaczonymi kolorami kulkami magnetycznymi, nasączonymi różnymi proporcjami fluoroforów odpowiadających odrębnym sygnaturyom spektralnym, ułatwiając wykrywanie wielu cytokin.
Cytokiny łzowe wiążą się z odpowiadającymi im przeciwciałami wychwytującymi związanymi z kulkami.
Za pomocą magnetycznej podkładki płytkowej osadź kompleksy przeciwciało-kulki. Za pomocą buforu usuń niezwiązane biomolekuły.
Dodaj biotynylowane przeciwciała wykrywające, które przyłączają się do związanych cytokin.
Pipeta koniugat streptawidyny-fikoerytryny, który wiąże się z biotynylowanymi przeciwciałami.
Za pomocą podkładki do płytek usuń niezwiązaną zawartość studzienki. Ponownie zawiesić kompleksy związane z cytokinami w płynie osłonkowym.
Podczas analizy próbki układ fluidyczny transportuje kompleksy kulek do zespołu optycznego.
Pierwszy laser aktywuje wewnętrzne barwniki perełkowe, a uzyskany w ten sposób sygnał identyfikuje określone cytokiny.
Drugi laser aktywuje cząsteczkę reporterową związaną z kompleksem kulkowym, którego intensywność sygnału reprezentuje stężenie cytokin, umożliwiając jednoc
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych