JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:03 min. • July 8th, 2025
Rozpocząć od wielodołkowej płytki zawierającej płyn z płukania oskrzelowo-pęcherzykowego myszy zawierający populację komórek odpornościowych wybarwioną zielonym fluorescencyjnym barwnikiem żywotności.
Wprowadź przeciwciała Fc, aby zablokować receptory Fc komórek odpornościowych.
Dodaj koktajl różnych przeciwciał znakowanych fluoroforem, skierowanych przeciwko określonym markerom komórkowym. Usunąć niezwiązane przeciwciała i ponownie zawiesić komórki w buforze.
Za pomocą cytometrii przepływowej zidentyfikuj singlety o słabej fluorescencji, wskazujące żywe komórki.
Oświetl komórki na 488 nanometrach, powodując emitację czerwonej fluorescencji korelującej z komórkami wykazującymi ekspresję CD11c.
W populacji o wysokiej zawartości CD11c, przy odpowiednich filtrach długości fali, zidentyfikuj białka markerów komórkowych MHC-II na komórkach dendrytycznych i SiglecF na makrofagach.
W populacji z niskim poziomem CD11c ekspresja CD3 na limfocytach T i CD19 na komórkach B umożliwia ich identyfikację.
Oświetl komórki na 405 nanometrach, emitując niebieską fluorescencję, oznaczającą neutrofile wykazujące ekspresję CD11b.
Oświetlanie komórek o długości 633 nanometrów wzbudza dalekoczerwone fluo
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych