Ocena potencjału przeciwdrobnoustrojowego mysich bakterii kałowych wytwarzających bakteriocynę
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:49 min. • July 8th, 2025
Weź mysią zawiesinę kałową zawierającą bakterie kwasu mlekowego lub LAB, które wytwarzają bakteriocynę, peptyd przeciwdrobnoustrojowy, i zaszczepij we wstępnie podgrzanym, selektywnym miękkim podłożu agarowym LAB.
Wlej pożywkę do płytki agarowej, tworząc pierwszą warstwę.
Nałożyć drugą warstwę agaru i inkubować.
Pierwsza warstwa selektywnie wspomaga wzrost LAB, umożliwiając wydzielanym cząsteczkom bakteriocyny dyfuzję na zewnątrz z kolonii do otaczającego podłoża.
Druga warstwa zawiera pożywkę bezkomórkową, która umożliwia dyfuzję bakteriocyny i zapobiega wzrostowi kolonii LAB na powierzchni.
Teraz wlej trzecią warstwę agaru zawierającą szczep wrażliwy na bakteriocynę.
Bakterie rosnące w trzeciej warstwie napotykają bakteriocynę dyfundującą z niższych warstw.
Bakteriocyna narusza błonę komórkową wrażliwych bakterii, zaburzając homeostazę komórkową i powodując śmierć komórki, widoczną jako wyraźna strefa na trzeciej warstwie.
Zmierz średnicę strefy, aby ocenić siłę działania bakteriocyny.
Aby policzyć komórki bakteryjne wytwarzające bakteriocynę w próbkach kału, przenieś rozcieńczone komórki producenta bakteriocyny do 4 mililitrów wstępnie ogrzanego miękkiego agaru MRS. Wymieszaj ag
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych