JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:10 min. • July 8th, 2025
Zarówno pyomelaninę, jak i szczepy bakteryjne niewytwarzające pyomelaniny należy traktować środkiem testowym.
Piomelanina, pigment zewnątrzkomórkowy, zapewnia ochronę przed stresem oksydacyjnym.
Badany czynnik zaburza biosyntezę pyomelaniny, zmniejszając jej produkcję.
Po inkubacji przeprowadzić seryjne rozcieńczenia bakteryjne buforem zawierającym badany czynnik lub rozpuszczalnik nośnika.
Punktowe rozcieńczenia bakteryjne na płytkach agarowych o różnych stężeniach nadtlenku wodoru - stresor oksydacyjny.
Płytki pozbawione nadtlenku wodoru służą jako kontrole.
Inkubować. Na płytkach kontrolnych bakterie tworzą kolonie.
W nieleczonym szczepie wytwarzającym pyomelaninę, pyomelanina chroni bakterie przed uszkodzeniem oksydacyjnym wywołanym nadtlenkiem wodoru, co prowadzi do powstania pigmentowanych kolonii.
Jednak szczep wytwarzający pyomelaninę poddany działaniu czynnika testowego, wykazujący zmniejszoną pyomelaninę, staje się wrażliwy na stres oksydacyjny, co prowadzi do śmierci bakterii.
Policz kolonie.
Zmniejszona liczba i wielkość kolonii wraz ze wzrostem stężenia nadtlenku wodoru w traktowanych szczepach wytwarzających pyomelaninę i zarówno poddanych działaniu środka oraz nielec
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych