JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:00 min. • July 8th, 2025
Rozpocznij od szkiełka zawierającego utrwalone, odparafiniowane i ponownie uwodnione odcinki biopsji tętnicy skroniowej z naciekającymi komórkami odpornościowymi, w tym limfocytami i makrofagami.
Aktywowane makrofagi wyrażają receptor kwasu foliowego beta lub FR-β - marker związany z chorobą, różnicujący makrofagi od innych komórek odpornościowych.
Przenieś szkiełko do wstępnie ogrzanego bufora, aby pobrać receptory powierzchniowe.
Potraktuj sekcję nadtlenkiem wodoru, blokując wewnątrzkomórkową aktywność peroksydazy.
Wprowadź mieszankę pierwszorzędowych przeciwciał skierowanych przeciwko CD3, CD68 i FR-β, które wiążą się z komórkami odpornościowymi wyrażającymi te białka.
Dodaj biotynylowane przeciwciała drugorzędowe, wchodzące w interakcję z przeciwciałami pierwszorzędowymi i umyj.
Nakładka z enzymami sprzężonymi ze streptawidyną, które wiążą się z biotyną.
Potraktuj chromogennym substratem, który oddziałuje z enzymami, wytwarzając zlokalizowane brązowe osady.
Wprowadź przeciwbarwienie — hematoksylinę, barwiąc jądra na niebiesko.
Mikroskopowo identyfikuj małe, okrągłe, brązowo zabarwione komórki jako limfocyty wykazujące ekspresję CD3, a duże, nieregularne, brązowo zabarwione komó
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych