JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:48 min. • July 8th, 2025
Rozpocząć od próbki zawierającej wirusa uzyskanej z zakażonej rogówki świni leczonej lekiem przeciwwirusowym.
Przeprowadzić seryjne rozcieńczanie próbki, aby stworzyć sekwencję malejących stężeń wirusa.
Optymalne rozcieńczenie zapobiega zakażeniu pojedynczych komórek wieloma wirusami.
Wprowadzić rozcieńczone próbki do monowarstwy komórki gospodarza i inkubować.
Wirus przyłącza się do receptora komórki gospodarza, wnika do komórki i inicjuje jej replikację. Zainfekowana komórka ulega lizie, uwalniając wiriony.
Dodaj metylocelulozę, lepką substancję, która ogranicza wirusy do pobliskich komórek.
Następnie wirusy powodują śmierć komórek i tworzenie się płytki nazębnej w zakażonym regionie.
Dodaj metanol, aby naprawić komórki.
Użyj fioletu krystalicznego do barwienia żywych komórek.
Obserwuj blaszki jako przezroczyste strefy wskazujące na zainfekowane komórki i śmierć komórki, otoczone niezainfekowanymi komórkami zabarwionymi krystalicznym fioletem.
Na koniec policz liczbę blaszek w najwyższym rozcieńczeniu, aby określić ilościowo miano wirusa w roztworze wyjściowym w celu określenia skuteczności leku przeciwwirusowego.
Aby określić ilościowo ilość wirusa pobranego z każdej rogówki, na
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych