Test przylegania do fazy stałej w celu oceny tworzenia się biofilmu
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:07 min. • July 8th, 2025
Weź płaską płytkę wielodołkową z dołkami zawierającymi bakterie w pożywce wzrostowej lub bakterie w pożywce wzrostowej uzupełnionej solą żółciową.
Sole żółciowe wywołują stres, powodując uszkodzenia komórek i uwalniając DNA i białka. Te biomolekuły pokrywają dno studzienek, umożliwiając ocalałym bakteriom przyleganie do powierzchni ciała stałego.
Przyłączone bakterie namnażają się, tworząc mikrokolonie i wytwarzając autoinduktory – czyli chemiczne cząsteczki sygnalizacyjne, umożliwiające komunikację bakterii.
Ta komunikacja skłania bakterie do kolonizacji i inicjowania produkcji zewnątrzkomórkowych substancji polimerowych lub EPS, generując biofilm.
Po inkubacji usuń pożywkę, aby wyeliminować swobodnie pływające bakterie.
Wprowadź krystaliczną fioletową plamę, która oddziałuje z peptydoglikanem ściany komórkowej bakterii, nadając jej fioletowy kolor.
Usuń nadmiar plamy i wysusz. Nakładka z etanolem w celu rozpuszczenia fioletu krystalicznego ze ściany komórkowej bakterii, zmieniając kolor roztworu.
Intensywniejsze zabarwienie w studzienkach poddanych działaniu soli żółciowej niż w studzienkach niepoddanych działaniu soli żółciowej potwierdza tworzenie się biofilmu poprzez przylegan
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych