JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:49 min. • July 8th, 2025
Zacznij od płytki wielodołkowej zawierającej biofilm bakteryjny — bakterie zamknięte w ochronnej zewnątrzkomórkowej substancji polimerowej lub EPS.
Odessać pożywkę, aby usunąć nieprzylegające bakterie i umyć.
Studzienki zawierające biofilm należy traktować samym buforem, buforem z glukozą, buforem z solami żółciowymi lub buforem z glukozą i solami żółciowymi.
Leczenie buforem i glukozą wspomaga uwalnianie enzymów bakteryjnych, które rozkładają EPS biofilmu.
Powoduje to demontaż biofilmu, uwalniając bakterie.
Podczas gdy sole żółciowe oraz połączenie soli żółciowych i glukozy naśladują warunki stresowe i zatrzymują bakterie w ochronnym EPS.
Przenieść supernatant z każdej studzienki na świeżą płytkę wielodołkową.
Rozcieńczone supernatanty rozcieńczyć na płytkach agarowych i inkubować.
Wylicz kolonie bakteryjne i określ dyspersję bakteryjną dla każdego zabiegu.
Większa dyspersja po leczeniu buforem i glukozą w porównaniu z leczeniem solami żółciowymi wskazuje na demontaż biofilmu.
Zapisz wartości OD600 z płytki biofilmu na noc na czytniku płytek, ustawiając dobrze kontrolę jako ślepą próbę. Następnie odessać pożywkę hodowlaną za pomocą linii próżniowej, nie zakłócając przylegającej po
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych