JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:37 min. • July 8th, 2025
Traktuj kultury neuronalne rosnącym stężeniem testowej toksyny.
Toksyna dostaje się do komórek i jest uwalniana do cytozolu.
W zależności od swojego potencjału, toksyna może zapobiegać fuzji pęcherzykowej, hamując uwalnianie neuroprzekaźników.
Zastąp pożywkę buforem zawierającym określone związki neurofarmakologiczne w celu zablokowania neuronalnych potencjałów czynnościowych.
Umieść naczynie hodowlane na etapie elektrofizjologii. Aby rozpocząć nagrywanie, połącz somę neuronu z pipetą zawierającą elektrodę rejestrującą.
Zastosuj stałe podciśnienie, aby zassać niewielką część membrany, tworząc gigaseal, szczelne uszczelnienie, które zapewnia minimalne zakłócenia podczas nagrywania.
Utrzymuj stałe napięcie błony, aby mierzyć prądy neuronalne.
Zastosuj impulsy podciśnienia, aby rozerwać membranę, ustanawiając bezpośredni kontakt między neuronem a pipetą.
Rejestruj prądy wytwarzane w neuronach w wyniku wychwytu neuroprzekaźników, zwanych mEPSC.
Spadek częstości mEPSC przy zwiększonej ekspozycji na toksyny wskazuje na zahamowanie uwalniania neuroprzekaźników.
Rozcieńczyć neurotoksynę botulinową serotyp A do 100-krotności pożądanego stężenia końcowego w pożywce hodowlanej ESN i ogrzać do
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych