JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:22 min. • July 8th, 2025
Zacznij od probówki zawierającej oddzielne wektory dla genów przeciwciał o łańcuchach ciężkich i lekkich.
Dodaj odczynnik do transfekcji, aby utworzyć kompleksy z wektorami.
Przenieś tę mieszaninę do komórek gospodarza ssaków i inkubuj w celu internalizacji.
Dodaj środek przeciwzbrylający, aby promować równomierne rozmieszczenie transfekowanych komórek, poprawiając regenerację i wzrost komórek.
Dodaj roztwór antybakteryjno-przeciwgrzybiczy, aby zapobiec zanieczyszczeniu.
W komórce gospodarza wektory integrują się z genomem gospodarza.
Po transkrypcji genów poszczególne mRNA opuszczają jądro i ulegają translacji, tworząc powstające łańcuchy przeciwciał.
Prawidłowe składanie i modyfikacja powstających łańcuchów daje ciężkie i lekkie łańcuchy.
Łańcuchy te łączą się, tworząc w pełni funkcjonalne przeciwciała, które są następnie uwalniane do pożywki zewnątrzkomórkowej.
Zbierz podłoże i odwiruj. Przefiltrować supernatant.
Przepuścić filtrat przez kolumnę oczyszczającą, która umożliwia selektywne wiązanie przeciwciał.
Za pomocą buforu elucyjnego elucję wymyć oczyszczone przeciwciała.
Hoduj komórki CHO w 200 mililitrach pożywki w długich kolbach Erlenmeyera z przegrodami. Połącz 5 mililitr
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych