JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:52 min. • July 8th, 2025
Weźmy hipokampy zarodków szczurów.
Dodaj trypsynę. Inkubuj, aby pośredniczyć w rozpadzie macierzy tkankowej, rozluźniając komórki hipokampa.
Rozcieńczyć buforem. Inkubować w celu kontynuacji trawienia enzymatycznego z trypsyną.
Następnie przenieś masę tkankową do probówki zawierającej podłoże. Kilkakrotnie pipetować w celu mechanicznej dysocjacji na pojedyncze komórki.
Komórki nasienne na szkiełkach nakrywkowych pokrytych poli-L-lizyną na płytkach hodowlanych.
Inkubować. Komórki hipokampa przylegają do pokrytych powierzchni. Neurony rozwijają blaszkę i wydłużają drobne neuryty.
Ponadto neuryty rosną z procesami aksonalnymi i dendrytycznymi, tworząc sieć neuronalną.
Dojrzałe neurony wyrażają synaptyczne receptory pobudzające, receptory N-metylo-D-asparaginianu lub NMDAR.
Po inkubacji przemyć szkiełka nakrywkowe pożywką.
Dodaj rozcieńczoną surowicę pacjenta z autoimmunologicznym zapaleniem mózgu. Autoprzeciwciała wiążą się z neuronalnymi NMDAR.
Umyj buforem, a następnie utrwal komórki.
Dodaj przeciwciała drugorzędowe znakowane fluoroforem, które wiążą się z autoprzeciwciałami związanymi z NMDAR.
Umyć buforem. Umieścić szkiełko nakrywkowe na podłożu montażowym zawierającym DAPI, aby w
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych