Wykrywanie krążących przeciwciał anty-glikanowych za pomocą drukowanej matrycy glikanów

Zacznij od funkcjonalizowanego glikochipa z wydrukowanymi podtablicami glikanów zorganizowanymi w bloki tablic

.

Każde miejsce w podtablicy reprezentuje odrębny glikan — polimer na bazie węglowodanów z różnicami w składzie monosacharydów, długości łańcucha i wzorze rozgałęzień.

Potraktuj glikochip buforem blokującym, aby zablokować niespecyficzne miejsca interakcji.

Przenieś glikochip i wprowadź rozcieńczoną surowicę myszy do buforu uzupełnionego środkami powierzchniowo czynnymi, aby zminimalizować agregację przeciwciał. Inkubować pod wpływem mieszania.

Pobudzenie sprzyja równomiernemu rozprowadzaniu surowicy, ułatwiając selektywne wiązanie przeciwciał antyglikanowych z określonymi glikanami w oparciu o różne cechy molekularne.

Przemyć zmniejszającymi się stężeniami buforu zawierającego środek powierzchniowo czynny, aby zakłócić niespecyficzne wiązanie i wypłukać.

Nałożyć glikochip na przeciwciała drugorzędowe sprzężone z biotyną przeciwko myszy, oddziałujące z wstępnie związanymi przeciwciałami antyglikanowymi i przepłukać.

Wprowadzić streptawidynę znakowaną fluoroforem, wiążąc się z biotynylowanymi przeciwciałami drugorzędowymi. Umyj i usuń nadmiar roztworu.

Zeskanuj glikochip i o