JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:38 min. • July 8th, 2025
Weź szkiełko z dołkami reakcyjnymi zawierającymi cienkie odcinki różnych tkanek roślinnych. Tkanki są utrwalane i zatapiane w żywicy w celu barwienia immunologicznego.
Umieść szkiełko w ciemnej i wilgotnej komorze inkubacyjnej, aby zapobiec ekspozycji na światło i parowaniu odczynnika podczas kolejnych etapów.
Wprowadzić roztwór blokujący, aby zapobiec nieswoistej interakcji przeciwciał.
Przemyć, aby usunąć nadmiar roztworu blokującego, a następnie dodać przeciwciała pierwszorzędowe specyficzne dla antygenu i inkubować.
Przeciwciała wiążą się z docelowymi antygenami, a mianowicie białkami arabinogalaktanu i pektynami w ścianie komórkowej.
Wprowadzić przeciwciała drugorzędowe sprzężone z fluoroforem, które wiążą się z przeciwciałami pierwszorzędowymi.
Umyć, aby usunąć niezwiązane przeciwciała i nałożyć barwnik fluorescencyjny, który wiąże się z celulozą, oznaczając ścianę komórkową.
Dodaj podłoże montażowe i uszczelnij szkiełkiem nakrywkowym.
Pod mikroskopem fluorescencja barwnika i związanych przeciwciał pomaga w wizualizacji celulozy w ścianach komórkowych roślin kolokalizowanych z białkami arabinogalaktanu lub pektynami, wykazując ich specyficzne dla tkanki rozmieszczenie.
Aby pr
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych