JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:42 min. • July 8th, 2025
Rozpocząć od pasywowanej płytki testowej pokrytej immunogennymi przeciwciałami monoklonalnymi specyficznymi dla glikoproteiny przeciwko wściekliźnie i środkiem blokującym, aby zapobiec niespecyficznym interakcjom.
Wprowadzić seryjnie rozcieńczoną referencyjną i testową szczepionkę przeciwko wściekliźnie o zmniejszającej się zawartości glikoproteiny. Uszczelnij płytę, aby zapobiec zanieczyszczeniu.
Podczas inkubacji glikoproteiny immunogenne oddziałują z powlekanymi przeciwciałami monoklonalnymi poprzez określone miejsce antygenowe.
Po inkubacji usuń folię, odessaj supernatant i umyj płytkę.
Nakładka z sprzężonymi z enzymami przeciwciałami monoklonalnymi specyficznymi dla glikoproteiny, które wiążą się z innym miejscem antygenowym na glikoproteinie, tworząc kompleks immunologiczny.
Dodaj roztwór zawierający substrat i chromogen. Kiedy substrat wchodzi w interakcję z enzymem, powoduje utlenianie chromogenu, zmieniając kolor roztworu.
Dodaj roztwór zatrzymujący, aby dezaktywować enzymy.
Zmierzyć absorbancję i wygenerować krzywą odniesienia, korzystając z wartości referencyjnych szczepionki.
Zidentyfikuj obszar, w którym istnieje liniowa zależność między absorbancją a zawartością gliko
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych