JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:05 min. • July 8th, 2025
Zacznij od rurki przenoszącej cząstki związane z błoną komórkową, zwane pęcherzykami zewnątrzkomórkowymi lub EV, które wykazują unikalny skład antygenowy.
Wprowadzenie nanocząstek magnetycznych, MNP, zawierających przeciwciała wychwytujące sprzężone z fluorescencyjnie znakowanymi fragmentami Fab.
Inkubować w celu ułatwienia interakcji między MNP ze specyficznymi antygenami EV, tworząc kompleksy MNP-EV.
Dodaj immunoglobulinę G, aby zablokować miejsca wiązania Fc, a następnie wprowadź znakowane fluorescencyjnie przeciwciała wykrywające, aby zabarwić inne antygeny na wychwyconych cząstkach.
Załaduj tę mieszaninę na wstępnie umytą kolumnę magnetyczną umieszczoną w separatorze magnetycznym.
Pole magnetyczne zatrzymuje cząstki wychwycone przez MNP w kolumnie. Wymień bufor w celu usunięcia niezwiązanych przeciwciał.
Wyjmij kolumnę z separatora magnetycznego, wymyj cząstki wychwycone przez MNP za pomocą buforu i utrwal je, aby zachować ich integralność strukturalną.
Analizuj wychwycone immunologicznie cząstki za pomocą cytometrii przepływowej; wyraźne sygnały fluorescencyjne z barwionych antygenów korelują z unikalnymi cechami antygenowymi EV.
Zacznij od połączenia 60 mikrolitrów MNP na wa
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych