Pomiar skuteczności fagocytarnej makrofagów za pomocą prymachiny i terapii fotodynamicznej
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:45 min. • December 22nd, 2025
Zacznij od wielodołkowej płytki zawierającej przylegające mysie makrofagi - lub fagocytarne komórki odpornościowe.
Wprowadź zawiesinę komórek grzyba Cryptococcus, wchodzącą w interakcję z receptorami makrofagów i internalizującą poprzez fagocytozę.
Fagosom łączy się z lizosomem, tworząc fagolizosom. Kwaśne środowisko fagolizosomu sprzyja przetrwaniu i namnażaniu się grzybów.
Wprowadzić do studzienek testowych wysokie stężenie prymachiny – fotouczulacza, podczas gdy w kontroli brakuje fotouczulacza. Inkubować w celu ułatwienia wychwytu prymachiny przez makrofagi.
Wystaw płytkę na działanie światła ultrafioletowego w celu leczenia fotodynamicznego lub PDT.
W studzience testowej prymachina tworzy rodnikowe kationy, które oddziałują z tlenem cząsteczkowym, wytwarzając reaktywne formy tlenu lub ROS.
ROS indukują śmierć grzybów, podczas gdy enzymy antyoksydacyjne makrofagów neutralizują ROS, zapobiegając uszkodzeniom komórek.
Przepuszczalność makrofagów, uwalnianie komórek grzybów.
Rozcieńczoną zawartość komórek rozprowadzić na selektywnych płytkach agarowych, uzyskując wyraźne kolonie grzybów.
Mniejsza liczba kolonii na płytce testowej w porównaniu z grupą kontrolną wskazuje na zwiększo
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych