Wpływ aspiryny i ibuprofenu na zdolność fagocytarną makrofagów

Zacznij od zawiesiny grzybów Cryptococcus. Dodaj roztwór biocząstek pochodzących z grzybów sprzężonych z barwnikiem fluorescencyjnym wrażliwym na pH, aby zabarwić komórki Cryptococcus.

Umyj, aby usunąć niezwiązany barwnik. Przenieś zabarwioną zawiesinę grzybów na wielodołkową płytkę z przylegającymi makrofagami - lub fagocytarnymi komórkami odpornościowymi.

Wprowadzić minimalne stężenie hamujące leku, takiego jak aspiryna lub ibuprofen, i inkubować, aby ułatwić wchłanianie leku.

Cząsteczki leku oddziałują z cyklooksygenazą-2 – enzymem syntetyzującym prostaglandyny, hamując jego aktywność.

Zapobiega to przemianie kwasu arachidonowego w prostaglandynę, zachowując wewnątrzkomórkowe poziomy cAMP i zwiększając zdolność fagocytarną makrofagów, ułatwiając internalizację grzybów.

Fagosom zawierający grzyby łączy się z lizosomem - kwaśną organellą, tworząc fagolizosom o kwaśnym pH i umożliwiając fluoryzację barwnika.

Komórki leczone lekiem wykazują wyższą fluorescencję niż komórki nieleczone, co sugeruje skuteczność leku w zwiększaniu zdolności fagocytarnych makrofagów.

Rozpocznij od hodowli mysiej linii komórkowej makrofagów, wyhodowanej w kompletnej pożywce RPMI 1640, zgodnie z opisem w p