JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:05 min. • December 23rd, 2025
Weź seryjne rozcieńczenia przeciwciał specyficznych dla ludzkiego wirusa cytomegalii lub HCMV.
Po dodaniu HCMV przeciwciała wiążą się z glikoproteiną B na otoczce wirusa, neutralizując wirusa.
Przenieś mieszaninę na ludzkie fibroblasty i inkubuj.
Kompleks glikoproteiny trimerowej na niezneutralizowanych wirusach wiąże się ze specyficznymi receptorami komórkowymi, wywołując fuzję błony wirusa-gospodarza za pośrednictwem glikoproteiny B i uwalniając wewnątrz nukleokapsyd zawierający genomowe DNA.
Uwolniony genom dostaje się do jądra, kodując białka zlokalizowane natychmiast wcześnie (IE) zlokalizowane w jądrze jądrowym.
Neutralizacja przeciwciał zapobiega przedostawaniu się wirusa do komórek.
Usuń niezinternalizowane wirusy. Potraktuj etanolem w temperaturze poniżej zera, aby utrwalić i przepuszczalność komórek.
Wprowadź przeciwciało pierwszorzędowe, które wiąże się z białkami IE.
Dodaj przeciwciało drugorzędowe sprzężone z fluoroforem, które wiąże się z przeciwciałem pierwszorzędowym i barwienie fluorescencyjne, które wiąże się z DNA.
Pod mikroskopem wykryj podwójnie barwione komórki, które są zainfekowane wirusem. Oblicz procent zakażonych komórek, aby określić neutralizację wirusa
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych