JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:42 min. • July 8th, 2025
Weźmy wektory retrowirusowe zmieszane z pierwotnymi komórkami śledziony.
Wektory zawierają transgeniczne RNA kodujące chimeryczny receptor antygenowy lub CAR, który jest ukierunkowany na antygen specyficzny dla nowotworu.
Cytokina interleukina-2 w pożywce selektywnie promuje proliferację limfocytów T, podczas gdy inne komórki ostatecznie umierają.
Przenieść mieszaninę na mikropłytkę pokrytą rekombinowanymi fragmentami fibronektyny.
Wirować, aby ułatwić fragmentom fibronektyny wiązanie wektorów i limfocytów T, pośrednicząc w interakcji wirus-komórka gospodarza, i inkubować.
Po fuzji otoczki wektorów z błoną komórkową enzymy wirusowe dokonują odwrotnej transkrypcji uwolnionego RNA do DNA i włączają go do genomu gospodarza.
Transdukowane limfocyty T wyrażają powierzchniowo związane CAR, składające się z zewnątrzkomórkowego zmiennego fragmentu przeciwciała ukierunkowanego na antygen specyficzny dla nowotworu i wewnątrzkomórkowe regiony sygnalizacyjne w odpowiedzi na antygen.
Ponownie zawieś komórki przed przeniesieniem ich do probówki.
Odwirować w celu odrzucenia supernatantu zawierającego niezinternalizowane wirusy i ponownie zawiesić komórki w buforze do dalszych testów.
Następnego d
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych