Generowanie podwójnie humanizowanego modelu myszy BLT (szpik kostny, wątroba, grasica)

Zacznij od znieczulonej myszy z niedoborem odporności, która nie ma komórek odpornościowych.

Potraktuj mysz subśmiertelną dawką promieni rentgenowskich, aby wyeliminować istniejące komórki macierzyste ze szpiku kostnego.

Przeprowadź sekcję myszy i dostarcz fragmenty ludzkiej płodu, wątroby i tkanki grasicy między nerkę a jej torebkę.

Zamknij nacięcie.

Wszczepiona wątroba i tkanka grasicy rosną, tworząc organoidy, które są agregatami komórkowymi przypominającymi narząd.

Po wyzdrowieniu należy wstrzyknąć ludzkie hematopoetyczne komórki macierzyste lub HSC do żyły ogonowej.

Wstrzyknięte HSC migrują do organoidu grasicy i szpiku kostnego, różnicując się w różne ludzkie komórki odpornościowe.

Podaj myszowi wodę uzupełnioną antybiotykami, aby zabić istniejące drobnoustroje jelitowe.

Za pomocą rurki doustnej wprowadź ludzkie drobnoustroje kałowe bezpośrednio do jelita myszy, aby przyspieszyć kolonizację drobnoustrojów.

W ten sposób opracowano podwójnie humanizowany model myszy BLT z ludzkim układem odpornościowym i drobnoustrojami jelitowymi.

Aby wszczepić tkanki wątroby i grasicy do lewej torebki nerkowej, najpierw umieść mysz w kapturze. W dniu zabiegu należy potraktować myszy subletaln