Doustne dostarczanie przekształconych komórek drożdży do układu odpornościowego myszy

Zacznij od rurki ustnej zawierającej zawiesinę genetycznie przekształconych, auksotroficznych drożdży, które nie są w stanie wytworzyć uracylozasady nukleotydowej.

Włóż rurkę ustną do ust skrępowanej myszy i poprowadź ją w dół do żołądka.

Zawiesinę drożdży należy podawać bezpośrednio do żołądka, dzięki czemu ostatecznie dotrze ona do jelita cienkiego.

Jelito cienkie zawiera komórki nabłonkowe, a leżące pod nim plamy Peyera są bogate w komórki odpornościowe.

Komórki mikrofałdowania, wyspecjalizowane komórki nabłonka jelitowego w pobliżu łat Peyera, pochłaniają komórki drożdży i internalizują je w pęcherzyki.

Pęcherzyki te przemieszczają się po komórkach i uwalniają komórki drożdży do leżącego pod spodem plastra Peyera.

Wyizoluj plaster Peyera z poświęconego jelita myszy i uzyskaj jednolitą zawiesinę komórkową.

Hodować tę zawiesinę komórkową na pożywce selektywnej dla drożdży zawierającej uracyl.

Drożdże auksotroficzne wykorzystują uracyl i namnażają się, tworząc kolonie, potwierdzając dostarczanie przekształconych komórek drożdży do jelitowego układu odpornościowego myszy.

Po przygotowaniu kultur drożdży zgodnie z protokołem tekstowym użyj hemocytometru, aby określić stężenie komóre