JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:16 min. • July 8th, 2025
Zacznij od powściągliwej myszy z niedoborem odporności NOD, która nie ma komórek odpornościowych i jest podatna na cukrzycę.
Tej myszy wstrzykuje się transgeniczne komórki beta trzustki, które wytwarzają insulinę i wyrażają enzymy lucyferazy.
Weź strzykawkę zawierającą wstępnie potraktowane splenocyty pochodzące od myszy z cukrzycą. Splenocyty zawierają autoreaktywne limfocyty T ze zdolnością rozpoznawania peptydów insuliny.
Podaj te splenocyty do żyły ogonowej myszy.
Splenocyty krążą i docierają do trzustki, gdzie autoreaktywne limfocyty T rozpoznają peptydy insuliny na komórkach beta i ulegają aktywacji.
Te aktywowane komórki uwalniają cząsteczki cytotoksyczne, inicjując niszczenie komórek beta poprzez autoreaktywność.
Następnie wstrzyknij substrat lucyferazy do otrzewnej myszy. Substrat dyfunduje w tym regionie i wnika do komórek beta.
W komórkach substrat oddziałuje z enzymami lucyferazy, wytwarzając luminescencję.
Korzystając z bioluminescencyjnego systemu obrazowania, rejestruj obrazy w regularnych odstępach czasu
Stopniowy spadek luminescencji wskazuje na zniszczenie transgenicznych komórek beta w wyniku autoreaktywności.
Rozgrzej ciało dorosłego biorcy, myszy NOD-scid, używ
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych