Budowa trójwymiarowych sieci neuronowych sprzężonych z układami mikroelektrod

Weź zawiesinę neuronów hipokampa zarodka szczura.

Przenieś neurony na obszar aktywny pokryty współczynnikiem adhezji układu mikroelektrod lub MEA. Ten obszar aktywny jest ograniczony przez strukturę polimeru.

Inkubuj MEA. Neurony przylegają do powlekanego obszaru aktywnego MEA, tworząc sieć neuronalną 2D.

Dodatkowo przenieś neurony na monowarstwę mikrokulek szklanych pokrytą współczynnikiem adhezji we wkładkach membranowych w płytce wielodołkowej.

Inkubuj, aby neurony przyczepiły się do kulek pokrytych współczynnikiem adhezji.

Przenieś mikrogranulki z przylegającymi neuronami do ograniczonego obszaru MEA zawierającego sieć neuronalną.

Mikrogranulki samoorganizują się, tworząc sześciokątną strukturę.

Powtórz transfer mikrokulek na MEA kilka razy, budując warstwy, które same się organizują, tworząc upakowaną strukturę 3D.

Dodaj pożywkę do zamkniętego obszaru aktywnego MEA i inkubuj.

Neurony rosną, tworząc połączoną sieć neuronalną 3D.

Umieść komórki w gęstości 2,000 komórek na milimetr kwadratowy w obszarze aktywnym MEA, zdefiniowanym przez ograniczenie PDMS, aby utworzyć sieć neuronalną 2D. Następnie umieść urządzenie MEA w inkubatorze z 5% nawilżoną atmosferą dwutlenku węgla o temp