JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:51 min. • July 8th, 2025
Pokrój korę myszy na małe kawałki i przenieś do zimnego podłoża preparacyjnego zawierającego zbuforowany roztwór soli.
Dodaj enzymy trawienne, aby dysocjować macierz zewnątrzkomórkową.
Aby usunąć resztki enzymów, przemyć zimnym medium preparacyjnym.
Zastąp tę pożywkę pożywką wzbogacającą astrocyty.
Następnie użyj pipety, aby oddzielić kawałki tkanki.
Przepuścić zawiesinę przez sitko, aby usunąć niezdysocjowaną tkankę i uzyskać pojedyncze komórki.
Przenieś ogniwa na dodatnio naładowaną płytkę pokrytą polimerem. Inkubować z potrząsaniem.
Astrocyty mocno przylegają, podczas gdy luźno związane neurony, mikroglej i oligodendrocyty odłączają się.
Pożywka wzbogacająca przekształca dojrzałe astrocyty w dzielące się astrocyty wielokątne.
Usuń oderwane komórki i umyj astrocyty buforem fosforanowym.
Dodaj enzymy trawienne, aby odłączyć astrocyty.
Dodaj pożywkę zawierającą surowicę, aby zatrzymać aktywność enzymatyczną. Zbierz astrocyty do probówki i odwiruj.
Odrzucić supernatant. Ponownie zawieś komórki w pożywce do dojrzewania astrocytów, aby promować typową dojrzałą strukturę astrocytów w kształcie gwiazdy.
Pokrój dowolną tkankę korową, która ma być użyta do wytworzenia astrocytów, na kawał
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych