JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:33 min. • July 8th, 2025
Weźmy transdukowane przez człowieka indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste lub hiPSC, z nadekspresją neurogeniny-2, napędzane przez system indukowany antybiotykiem doksycykliną.
Przenieś je do obszarów elektrod aktywnych pokrytych białkiem adhezyjnym w studzienkach wielodołkowej matrycy mikroelektrod.
Pozwól hiPSC przyczepić się do powlekanych obszarów elektrod aktywnych.
Dodaj pożywkę uzupełnioną doksycykliną, która indukuje nadekspresję neurogeniny-2, specyficznego dla neuronów czynnika transkrypcyjnego.
Neurogenina-2 uruchamia szlaki molekularne i prowadzi do różnicowania hiPSC w neuronalne komórki prekursorowe, podczas gdy składniki mediów wspomagają przeżycie komórek.
Wprowadź astrocyty do studzienek układu mikroelektrod, gdzie przylegają do obszaru aktywnego elektrody.
Zastąp pożywkę pożywką neurobazalną zawierającą neurogenne czynniki wzrostu, doksycyklinę i inhibitor wzrostu komórek.
Inhibitor zapobiega proliferacji astrocytów i eliminuje niezróżnicowane hiPSC.
Z biegiem czasu utrzymująca się ekspresja neurogeniny-2 i czynniki wzrostu napędzają różnicowanie neuronalnych komórek prekursorowych w neurony.
Ponadto zastąp pożywkę pożywką neuropodstawną zawierającą suro
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych