JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:00 min. • July 8th, 2025
Zacznij od komory mikroprzepływowej pokrytej polimerem z dołamkami proksymalnymi i dystalnymi połączonymi wieloma mikrorowkami.
W studzience proksymalnej umieść embrionalne tkanki rdzenia kręgowego myszy bogate w rozwijające się neurony ruchowe.
Uzupełnij to dobrze pożywką. Inkubuj, aby umożliwić wzrost neuronów i przyleganie do powierzchni pokrytej polimerem.
Później dodaj pożywkę bez czynnika wzrostu do studzienki proksymalnej
.W studzienkach dystalnych dodaj większą objętość pożywki zawierającej czynniki wzrostu, aby uzyskać różnice w stężeniu i objętości.
Różnice te powodują, że aksony, dłuższe projekcje neuronalne, rosną w kierunku dystalnych studzienek przez mikrorowki.
Dodaj fluorescencyjny roztwór barwnika do obu studzienek.
Cząsteczki barwnika dostają się do neuronów i barwią mitochondria i kwaśne organelle na obu końcach.
W obrazowaniu konfokalnym na żywo fluorescencyjnie barwione organelle poruszają się w obu kierunkach między ciałami komórek nerwowych a aksonami, potwierdzając transport aksonalny w neuronach ruchowych.
Usunąć całe podłoże z proksymalnej komory MFC. Podnieś pojedynczy eksplant rdzenia kręgowego za pomocą pipety o łącznej objętości czterech mikrolitrów i
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych