JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:51 min. • July 8th, 2025
Weźmy szczura, który został poddany eutanazji.
Otwórz brzuch, wytnij pęcherz i zanurz go w buforze.
Rozetnij pęcherz moczowy i usuń przylegający tłuszcz i resztki tkanek.
Przenieś pęcherz do probówki zawierającej bufor, odwiruj i usuń zanieczyszczenia.
Umieść tkankę w roztworze zawierającym kolagenazę i zmiel ją. Dodaj więcej kolagenazy, aby zdegradować macierz zewnątrzkomórkową, rozluźniając komórki.
Odwirować i wyrzucić supernatant. Dodaj trypsynę, aby zakłócić połączenia komórka-komórka, uwalniając komórki.
Dodać pożywkę płuczącą zawierającą białka, aby dezaktywować trypsynę, następnie odwirować i usunąć supernatant.
Ponownie zawiesić komórki w pożywce, przefiltrować je w celu usunięcia agregatów i uzyskać zawiesinę jednokomórkową.
Odwirować i usunąć supernatant. Ponownie zawieś komórki w pożywce.
Umieść komórki na powlekanych szkiełkach nakrywkowych, aby ułatwić przyczepianie się komórek neuronalnych i glejowych. Usuń nieprzyłączone komórki.
Dodaj pożywki neuronalne zawierające czynniki wzrostu, aby promować dojrzewanie komórkowe, ustanawiając pierwotną kulturę neuronalną i glejową.
Zacznij od umieszczenia szczurów na wysterylizowanym ręczniku chirurgicznym i odsłonięcia brzuch
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych